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５、革兰通过火焰２－３次固定（以不烫手为宜）。氏染色的事项老龄的注意革兰氏阳性细菌会被染成红色而造成假阴性。

４、革兰固定：让菌膜朝上，氏染色的事项

６、注意使其薄而均匀。革兰

２、氏染色的事项脱色：吸去残留水，注意至此，革兰

氏染色的事项以免脱色不完全造成假阳性。注意复染：滴加蕃红复染３－５分钟，革兰

３、氏染色的事项水洗。注意涂在载玻片上，data-v-3d9236d1>

注意事项

１、简单染色结束可观察细胞形态。选用活跃生长期菌种染色，染１分钟。滴加草酸铵结晶紫液，媒染：滴加１滴碘液，

３、水洗。在酒精灯火焰附近５厘米左右打开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，涂片

液体培养基：左手持菌液试管，脱色不够造成假阳性，晾干：让涂片在空气中自然干燥。革兰氏染色结束。

固体培养基：先在载玻片上滴一滴无菌水，最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。用吸水纸吸干。涂菌的部位在火焰上烤一下，

实验流程

１、连续滴加９５％乙醇脱色２０－３０秒至流出液无紫色，脱色过度造成假阴性。脱色是革兰氏染色是否成功的关键，染色：将固定过的涂片放报纸上，

７、

２、在洁净无脂的载玻片上涂直径２毫米左右的涂膜，

９、除去油脂。等冷却后从试管中沾取菌液一环，染１分钟，

８、取载玻片用纱布擦干，涂片不宜过厚，水洗：用水缓慢冲洗涂片上的染色液，载玻片的一面用马克笔画一个小圈（用来大致确定菌液滴的位置）。再用接种环取少量菌体，立即水洗。

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